チラ実生チャレンジ(2020.03.31~)

クリーンベンチもオートクレーブもありませんがハイポ寒天培地に播種してみました。諸先輩のご意見、アドバイスなど頂けると幸いです。

2020.03.31

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2020.03.31簡易無菌播種にチャレンジ

ヤフオクでイオナンタの種を手に入れたので簡易無菌播種されてる方のブログ等を参考にしながらハイポネックス培地を作成して播種しました。


🌱材料(ハイポ培地500ml用)🌱

*密閉出来る容器
*次亜塩素酸ナトリウ ム0.05%溶液
*消毒液を入れる霧吹き
*微分ハイポネックス1.5g
*寒天8g
*ショ糖10g
*種消毒用カップ
*種を掴むピンセット2つ
*種子

*作業する周辺はエタノールで消毒するとありましたが、現在エタノールが手に入らないのでキッチンハイターを希釈したものを全ての消毒に使用。
水1リットルにキャップ1杯(25ml)で0.05希釈液になります。

*ショ糖はグラニュー糖を使用。

*小数点まで計れるスケールはありませんが微粉ハイポネックスに2gと1gの計量スプーンが付属してるのでアバウトに計量。

*カッチカチの硬めの培地になりました。もっと寒天少なめがいいと思います。



🌱手順🌱

水500ml、寒天、ショ糖、微分ハイポネックスを小鍋に入れてかき混ぜて火に掛けて溶かす
出来上がったら表面に消毒スプレー

作業台やピンセット、容器内部、容器蓋内側に消毒スプレー
細菌は上から降ってくるので蓋は裏返して置く

冷めないうちに容器に入れて表面に消毒スプレーをして固まるまで蓋をしておく

追記:諸先輩から鍋よりレンチンがコンタミ防止になると教えて頂きました。今後はレンチンにします。


🌱培地の見直し🌱(2020.04.22)

ハイポ培地250ml用

寒天培地は白いので観察がし辛い。アガーなら透明で弾力があるはずなのでアガーを探しましたが、手に入らず買えたのは寒天が混ざってるアガーでしたが試してみることに。


レンチンで量も少なく作ります。


*微分ハイポネックス0.7~0.8g
*寒天入りアガー5g(一袋)
*ショ糖5g
*水250ml

ダイソーで購入したレンチン出来るカップ600ml用に材料をぶち込みマドラーで混ぜて、フタは閉めずに軽くのせて沸騰するまでチン(途中で取り出し2~3回かき混ぜました)
無色透明とは行きませんでしたが、透明度は上がり、弾力がゼリーみたいな感じになりました。

種の消毒

ピンセットで種をカップに入れて完全に浸るまで消毒液を注ぎ、ラップをして10分以上置きました。
私はお弁当に使うカップを使用しましたが、こぼれやすいので小さな紙コップなどが扱い易いかも

播種

固まったハイポネックス培地に消毒した種を撒きます。

綿毛が絡まってしまうのでピンセット2つで丁寧にはがしながら固まった培地に置いていきます。(綿毛はカットしても良かったのかも?)

播種したら消毒スプレーを上からシュッシュッし蓋をします。

カビ発生で全滅なんて事を防ぐ為に4つに分けました。

美容器具を用いて...

毎日朝晩使ってる美容器具
炭酸ガスで化粧水をミスト状にして吹き掛けるものです笑

仕上げの消毒スプレー時にこの器具使って炭酸ガスを4つのうちの2つに注入してみました

さて、どうなるのか?

LEDライトがあたるラックへ

マステに書いてラベルを貼りラックへ

さて、いつ頃発芽してくれるのか?失敗に終わるのか?

また2~3週間後に更新しまーす。

播種から2週間コンタミ(閲覧注意)

4つのうちの1つにカビが💦昨夜は何でもなかったんですが、恐ろしいです😭この瓶の形状的に消毒液スプレーが届いてなかったと思われます。
もうこの中はカビ菌がいっぱいだと思いますが、培地や種子にはカビが見えなかったので救出する事にします。

播種2週間種子の様子

拡大してるのでちょっとボヤけてますが、みんな緑色になり膨らんで来てます。

救出作業

今後の播種用に見やすい試験管ポリ袋を注文してますが、まだ届いてません😢ジップ式のポリ袋に前回作って保管していた培地をレンチンして、作業しやすい温度に冷ましてから小分け。
寒天が固まるまでの間に救出した種子を消毒液に10分間浸して二つに分けました。
さて、今後どうなるか😅
発芽したらまた更新します。

播種から一ヶ月

どうしてもピンボケしちゃい、見づらい(^_^;
17個播種し、発芽しなかったのは1つのみ。ゆっくり成長中ですが、上の子が変色してきてます。コンタミからの救出組なんですが、この子はダメかも(T^T)

4/21にアガー培地(寒天入り)にして追加で播種してます。培地が固まってなかった様で2つ完全に埋もれてますが、プックリと緑色になって来ました。溺死してなくてよかったです(^^)

播種から40日目(2020.05.10)

最近の暖かさで葉っぱらしくなって来ました(∩´∀`∩)
可愛い!!体長は4~5mm

播種から約60日(2020.05.28)

初根

発根

発根ーー!!
体長は前回とさほど変化無く大きいもので6ミリ程、コンタミからの救出組が発根してました。しかも培地じゃなく空を目指してます(笑)

17播種し発芽しなかったのは1、カビちゃったのが4、枯れたのが2、育たなくなり怪しいのが1

9個は今のところ順調そうです。

4/21追加で播種したアトロも溺れる事無く順調ですが、密です💦

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『チラ実生チャレンジ(2020.03.31~)』のみどりのまとめをみんなに紹介してみましょう

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昔、トイレにこもってやりましたよ🎵ハイターとアルコールで滅菌して…塩素が残っててほぼ失敗😵食虫植物ひとつだけ成功しましたが、手間がかかるので自分でやるのは諦めました💧

2020/03/31

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@ぷらんたろう さん
トイレ(笑)確かに個室で除菌しやすそうでね😆ぷらんたろうさんはバンバン実生に成功し花まで咲かせちゃってるイメージでした。やっぱり難しいんですね💦ド素人の私発芽するかドキドキします😱😱

2020/03/31

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うわぁ、実生チャレンジ⁉️
すばらしい挑戦、心から応援📣しますッッッ🤩

2020/03/31

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@TheDeko8 さん
ありがとう御座います♪初挑戦なのでどうなる事か謎ですが、毎日祈りながら観察していきまーす😆

2020/03/31

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すっごく勉強してやってるね👍
私は教えられた通り、簡単にやってましたが、やっぱり途中で死滅してしまいました⤵️T^T

頑張って成功させてください💪

2020/05/06

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@てんてん8865 さん
私的には朝晩水遣りとかするのが大変できっとダメにしちゃうなと思って、培地作るのは面倒だけど、後の管理が楽なんですよね。夏を超えられる自信ないけど頑張ってみまーす😆

2020/05/06

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こ、細かいですね、、、😱✨
ものぐさな私にできるのか、、、🤔ごくり
美顔器にも目がいってしまいました🤣✨

2020/05/30

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@pipi さん
最初が面倒くさかったけど、後はなーんもせず観察してただけなので楽です😊美顔器もズボラ向き(笑)

2020/06/01

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